2435

2435

بررسي جداسازي و خالص سازي ليزوزيم با استفاده از نانو زيستجاذب جديد مغناطيسي Isinglass@Fe3O4

كارشناسي ارشد

شيمي تجزيه

بهمن ماه 1394

بهمن ماه 1394

دكتر افسانه ملاحسيني

دكتر شهرزاد جوانشير

شيمي

چكيده: جداسازي و خالص¬سازي مؤثر پروتئين¬ها براي پيشرفت¬هاي اخير در تحقيق زيست دارويي و فارماسيوتيكي ضروري شده است. در اين تحقيق، ليزوزيم به علت عملكرد¬هاي فيزيولوژيكي و فارماسيوتيكي¬اش مانند خاصيت ضد باكتري و ضد ويروس، به عنوان پروتئين نمونه جهت بررسي جذب آن روي كامپوزيت مغناطيسي Isinglass@Fe3O4انتخاب شد.بدين منظور جذب ليزوزيم از محلول آبي توسط كامپوزيت مغناطيسي Isinglass@Fe3O4با استفاده از اسپكترومتريUV-Vis در طول موج 280 نانومتر بررسي گرديد. اثراتpH، قدرت يوني، زمان جذب، غلظت اوليه¬ي ليزوزيم و مقدار جاذب روي جذب ليزوزيم از محلول آبي با استفاده از فرايند جذب بسته بررسي شد. شرايط بهينه عبارتند از: زمان تعادل 90 دقيقه،2/6pH= ، غلظت اوليه¬ي ليزوزيم 5/0 ميلي¬گرم بر ميلي¬ليتر، مقدار جاذب 20 ميلي¬گرم و قدرت يوني صفر. با بررسي سينتيك جذب مشخص شد كه سينتيك جذب با سينتيك شبه مرتبه¬ي دوم بهترين تطابق را دارد. داده¬هاي ايزوترم تعادلي به خوبي با ايزوترم لانگموئر با بيش¬ترين ظرفيت جذب 149 ميلي¬گرم بر گرم ايزين¬گلس مغناطيسي تطبيق شدند. مقدار انحراف استاندارد نسبي با سه بار تكرار تحت شرايط بهينه 9/4% به دست آمد. مخلوط ليزوزيم و آلبومين سرم گاوي به عنوان پروتئين¬هاي نمونه انتخاب شدند تا گزينش¬پذيري جذب ليزوزيم بررسي شود. سپس، كامپوزيت مغناطيسي ايزين¬گلس براي استخراج ليزوزيم از محلول سفيده¬ي تخم¬مرغ به كار رفت. آناليز الكتروفورز با ژل پلي¬آكريل¬آميد نشان داد كه جذب ليزوزيم از مخلوط پروتئين گزينش¬پذير بود و خلوص ليزوزيم به دست آمده از سفيده¬ي تخم¬مرغ بسيار بالا بود. واژه‌هاي كليدي: جذب ليزوزيم، جداسازي پروتئين، نانوذرات مغناطيسي ايزين¬گلس، سفيده¬ي تخم¬مرغ