-
شماره ركورد
11692
-
شماره راهنما(اين فيلد مربوط به كارشناس مي‌باشد لطفا آن را خالي بگذاريد)
11692
-
پديد آورنده
ضياالدين راثي
-
عنوان
بررسي عوامل موثر بر تثبيت آنزيم هيدروليز كننده بر نانوذره مغناطيسي
-
مقطع تحصيلي
كارشناسي ارشد
-
رشته تحصيلي
شيمي - بيوتكنولوژي
-
سال تحصيل
دي 1391
-
تاريخ دفاع
دي 1391
-
استاد راهنما
دكتر پريسا حجازي
-
چكيده
چكيده
تثبيت يكي از شيوه‌هاي رايج اصلاح آنزيم‌ها و بهينه¬سازي فرآيندهاي تحت كاركرد آن¬ها به¬شمار مي‌رود. استفاده از نانوذرات مغناطيسي يكي از روش‌هاي نوين براي تثبيت بيومولكول¬ها مي¬باشد. اين ذرات به علت داشتن نسبت سطح به حجم بالا، قابليت تشكيل پيوند بيشتري با آنزيم‌ها را دارند. خاصيت مغناطيسي اين نوع نانوذرات، قابليت جداسازي آنها و به تبع آن آنزيم تثبيت يافته بر روي آنها را از ساير مواد موجود در محيط، فراهم مي‌آورد. اين خواص و قابليت استفاده مكرر از اين بيوكاتاليست¬ها، عرصه‌هاي نويني را در طراحي و بهينه‌سازي بيوكاتاليست‌ها و درمان بيماري‌ها پيش روي محققين قرار داده است. در اين تحقيق نانوذرات مغناطيسي Fe3O4 (MNP) به روش هم‌رسوبي توليد و سپس با مواد مختلفي مثل PEG6000، TEOS و APTES پوشش داده شد و روش جديدي براي توليد نانوذرات Fe3O4-SiO2 ارائه گرديد. سطح نانوذرات پوشش داده‌شده با SiO2 با روش سل ژل و استفاده از APTES، اصلاح و آمين‌دار شد. نانوذرات آمين‌دار شده با استفاده از آناليز FTIR، عكس برداري SEM و آناليز VSMمورد مطالعه قرار گرفت. آنزيم آميلاز با استفاده از پيوند دهنده‌ي گلوتارآلدهيد و تشكيل پيوند كووالانسي بر روي نانوذرات Fe3O4-SiO2 آمين‌دار شده تثبيت و عوامل موثري همچون دما، اسديته و غلظت مواد، بر تثبيت، فعاليت آنزيم بعد از تثبيت و سينتيك آنزيم تثبيت شده بررسي شد. بيشترين فعاليت آنزيم تثبيت شده در بارگذاري 50 ميلي‌گرم آنزيم آميلاز بر گرم نانوذرات به دست آمد و آنزيم تثبيت شده در 6 مرحله استفاده‌ي مجدد و همچنين 30 روز ذخيره سازي در بافر فسفات‌سيترات با اسيديته‌ي 6 توانست 100 درصد فعاليت خود را حفظ كند. در ادامه، آنزيم سلولاز به صورت جذب سطحي فيزيكي بر روي نانوذرات Fe3O4-PEG تثبيت شد. همچنين تاثير عوامل موثر بر تثبيت آنزيم سلولاز همچون دماي توليد و پوشش‌دهي ذرات، pH و غلظت يون¬هاي محيط در مراحل مختلف فرآيند تثبيت آنزيم و عملكرد آنزيم تثبيت شده مورد مطالعه قرار گرفت. بيشترين فعاليت نسبي به دست آمده براي آنزيم سلولاز تثبيت شده حدود 5/52% آنزيم آزاد مي‌باشد كه در بارگذاريmg Enzyme/g MNPs 500 حاصل شده است.
واژه‌هاي كليدي:تثبيت آنزيم، نانوذرات مغناطيسي، پوشش¬دهي، تثبيت كووالانسي، جذب فيزيكي
-
لينک به اين مدرک :
