14500

14500

مولكول نگاري مغناطيسي پليمرها به منظور جداسازي و بازشناسي آميلاز

كارشناسي ارشد

بيوتكنولوژي

اسفند ماه 1393

اسفند ماه 1393

دكتر پريسا حجازي

مهندسي شيمي

چكيده پليمرهاي مولكول نگاري شده پليمرهايي هستند كه در حضور يك مولكول الگو تهيه مي¬شوند و به عنوان قالب مولكولي براي اتصال مولكول¬هاي مشابه مولكول الگو به¬كار مي¬روند و به صورت گزينشي عمل مي¬كنند. به دليل مشكلاتي كه در مولكول نگاري پروتئين¬ها و ساير درشت مولكول¬ها وجود دارد، استفاده از روش مولكول نگاري سطحي پيشنهاد مي¬شود. استفاده از نانوذرات مغناطيسي به عنوان يكي از پايه¬هاي به كار رفته در مولكول نگاري سطحي به دليل سهولت در جداسازي از محيط مورد مطالعه قرار گرفته¬است. در تحقيق حاضر مولكول نگاري سطحي آنزيم آلفا-آميلاز بر پايه نانوذرات مغناطيسي اكسيد آهن بررسي شدهو اثر پوشش نانوذرات مغناطيسي، غلظت اجزاي پليمريزاسيون، حلال سنتز و مرحله شستشوي پليمر نگارش شده مورد مطالعه قرار گرفته است. نتايج حاصل از بررسي پوشش نانوذرات نشان داد كه استفاده از پوشش سيليكايي با اصلاح سطح وينيلي از بين پوشش آميني، آلدهيدي و سيليكايي مناسب¬ترين پوشش براي قرار گرفتن پليمر بر روي سطح نانوذرات مي¬باشد. از بين حلال¬هاي سنتز مورد مطالعه، استفاده از بافر استات-استيك¬اسيد با 5=pH و غلظت 1/0 مولار بهترين نتيجه را در پليمريزاسيون نشان داد. با توجه به بررسي¬هاي انجام شده در آزمايش¬هاي شستشو، سديم هيدروكسيد با غلطت 90 ميلي¬مولاراز بين حلال¬هاي استيك اسيد، SDS، استيك اسيد- SDS و سديم هيدروكسيد با غلظت¬هاي مختلف،به عنوان بهترين حلال شستشو انتخاب شد و زمان شستشو در سه ساعت بهترين تاثير را بر ميزان خارج كردن آنزيم از داخل شبكه پليمري و ميزان بازجذب نشان داد. به دليل تكرار پذيري پايين در نتايج بازجذب، اين پاسخ به عنوان يكي از معيارهاي انتخاب بهترين نمونه مولكول نگاري شده در نظر گرفته شد. در شرايطي كه غلظت كل مونومر ppm 3500، مقدار مونومر اكريل آميد 4 برابر مونومر متااكريليك¬اسيد، ميزان اتصال¬دهنده عرضي 9% وزني و مقدار آغازگر 1/0% وزني مونومرها مي¬باشد، ميزان بازجذب پليمر نگارش شده mg/g 45 و مقدار آن براي پليمر نگارش نشده mg/g 8 به دست آمد. مقدار فاكتور نگارش به دست¬آمده از اين مطالعه مقدار 6/5 مي-باشد.صحت آزمايش¬هاي انجام شده با استفاده از آناليزهاي TGA، SEM و FT-IR مورد بررسي قرار گرفت. واژه‌هاي كليدي:مولكول نگاري، آلفا-آميلاز، پلي¬اكريل آميد، نانوذرات مغناطيسي اكسيد آهن، فاكتور نگارش